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基于超快速氣相電子鼻構(gòu)建不同產(chǎn)地胡椒及胡椒提取物指紋圖譜庫及應(yīng)用研究
發(fā)布日期:2023-11-14
        胡椒為胡椒科胡椒屬多年常綠藤本植物,胡椒中的揮發(fā)油是胡椒香氣的主要來源,也是反映胡椒香氣的重要指標(biāo),胡椒中揮發(fā)油的含量及組成成分不僅受到胡椒品種、產(chǎn)地環(huán)境因子(如產(chǎn)地氣候、雨量、日照時(shí)間、土質(zhì)等)的影響,還受到提取加工方法、提取部位和采收時(shí)期等外在因素的影響。
        利用超快速氣相電子鼻技術(shù),解析不同產(chǎn)地胡椒及胡椒提取物揮發(fā)性電子鼻響應(yīng)特征并構(gòu)建指紋圖譜庫,通過主成分分析建立胡椒及胡椒提取物分類的有效判別模型,同時(shí)解析胡椒及胡椒提取物物質(zhì)成分構(gòu)成特征。
       01材料與方法
       材料與試劑
        不同產(chǎn)地胡椒原料(斯里蘭卡胡椒原料、印尼胡椒原料、越南胡椒原料)、胡椒精油產(chǎn)品(斯里蘭卡胡椒精油、印尼胡椒精油、越南胡椒精油)、胡椒油樹脂產(chǎn)品(斯里蘭卡胡椒油樹脂、印尼胡椒油樹脂、越南胡椒油樹脂)、nC6-nC16正構(gòu)烷烴標(biāo)準(zhǔn)溶液。
       儀器與設(shè)備
       超快速氣相電子鼻(Heracles Neos150)
        方法
        樣品制備
        胡椒原料:將胡椒原料樣品除雜、挑選出胡椒中的雜質(zhì),每個(gè)樣品分別稱取1.0g于20mL頂空瓶中,加蓋密封待檢,每個(gè)樣品制備3個(gè)平行樣;
        胡椒精油:將胡椒精油搖勻后,取20μL胡椒精油于20mL頂空瓶中,加蓋密封待檢,每個(gè)樣品制備3個(gè)平行樣;
        胡椒油樹脂:取0.1g胡椒油樹脂于20mL頂空瓶中,加蓋密封待檢,每個(gè)樣品制備3個(gè)平行樣。
        檢測(cè)參數(shù)
        胡椒原料:樣品量1.0g,進(jìn)樣體積2mL,孵化溫度80℃,孵化時(shí)間20min,50℃恒溫30s,1℃/s速率升溫至80℃恒溫30s,1℃/s速率升溫至125℃恒溫10s,3℃/s速率升溫至250℃恒溫11s;
        胡椒精油:取樣量20μL,進(jìn)樣體積500μL,孵化溫度60℃,時(shí)間20min,45℃恒溫35s,1℃/s速率升溫至70℃恒溫30s,0.5℃/s速率升溫至140℃,3℃/s速率升溫至251℃恒溫21s;
        胡椒油樹脂:取樣量0.1g,進(jìn)樣體積500μL,孵化溫度60℃,時(shí)間20min,50℃恒溫30s,1℃/s速率升溫至85℃恒溫30s,1℃/s速率升溫至125℃恒溫10s,3℃/s速率升溫至250℃恒溫10s。
        檢測(cè)設(shè)置
        將準(zhǔn)備好的裝有樣品的頂空瓶按順序放到樣品盤中,每3個(gè)平行樣后加一個(gè)空白樣(空瓶,用于消除對(duì)下一個(gè)被測(cè)樣品的信號(hào)影響),按照檢測(cè)程序分析樣品。
        數(shù)據(jù)處理
        主要采用Heracles超快速氣相電子鼻自帶軟件Alphasoft分析軟件方法處理數(shù)據(jù)。
        物質(zhì)定性和定量
        采用正構(gòu)烷烴標(biāo)準(zhǔn)溶液(nC6-nC16)進(jìn)行校準(zhǔn),將保留時(shí)間轉(zhuǎn)換為保留指數(shù),利用超快速氣相電子鼻自帶數(shù)據(jù)庫AroChembase數(shù)據(jù)庫對(duì)樣品中的成分進(jìn)行定性分析,采用峰面積歸一法對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行定量分析,確定各香氣成分相對(duì)含量。
        02結(jié)果與分析
        指紋圖譜分析及物質(zhì)定性
        采用正構(gòu)烷烴標(biāo)準(zhǔn)溶液(nC6-nC16)進(jìn)行校準(zhǔn),根據(jù)DB-5和MXT-1701兩根柱子的保留指數(shù),結(jié)合AroChembase數(shù)據(jù)庫對(duì)樣品中主要揮發(fā)性成分進(jìn)行定性分析,得到可能性化合物。通過對(duì)比色譜圖(圖1)發(fā)現(xiàn),樣品間的出峰時(shí)間及出峰位置基本一致,但峰面積間存在差異,說明樣品中揮發(fā)性成分的種類基本一致,但在含量上存在差異。
實(shí)驗(yàn)樣品:斯里蘭卡胡椒原料、印尼胡椒原料、越南胡椒原料;
                                              1電子鼻色譜圖
斯里蘭卡胡椒原料、印尼胡椒原料、越南胡椒原料指紋圖譜
       胡椒原料中分析出10種含量較高成分,不同產(chǎn)地胡椒原料不僅成分種類上有差異,各成分相對(duì)含量上同樣差異明顯。其中越南胡椒原料中3-蒈烯相對(duì)含量最高,且檜烯、γ-松油烯僅存在于斯里蘭卡胡椒原料和印尼胡椒原料中,由此可利用胡椒原料產(chǎn)品中3-蒈烯、檜烯、γ-松油烯相對(duì)含量區(qū)分不同產(chǎn)地胡椒原料。
表1 斯里蘭卡胡椒原料、印尼胡椒原料、越南胡椒原料特征化合物相對(duì)含量
2風(fēng)味化合物含量
        實(shí)驗(yàn)樣品:斯里蘭卡胡椒精油、印尼胡椒精油、越南胡椒精油;
 
3電子鼻色譜圖
                                                                                                                 圖2 斯里蘭卡胡椒精油、印尼胡椒精油、越南胡椒精油指紋圖譜
        胡椒精油中分析出10種含量較高的香氣成分,與原料不同的是胡椒精油香氣成分種類要多于胡椒原料,且不同產(chǎn)地胡椒精油的差異主要在于越南胡椒精油α-蒎烯相對(duì)含量較低,3-蒈烯相對(duì)含量較高,這可能是造成越南胡椒精油與斯里蘭卡、印尼胡椒精油香氣差異的主要原因。斯里蘭卡胡椒精油中3-蒈烯相對(duì)含量較高、α-蒎烯相對(duì)含量較低、斯里蘭卡胡椒精油中α-蒎烯相對(duì)含量較高、3-蒈烯相對(duì)含量較低,印尼胡椒精油D-檸檬烯相對(duì)含量較低,可利用α-蒎烯、3-蒈烯、D-檸檬烯相對(duì)含量用于區(qū)分不同產(chǎn)地胡椒精油種類。
                                                                                                               表2 斯里蘭卡胡椒精油、印尼胡椒精油、越南胡椒精油特征化合物相對(duì)含量
                                                    4風(fēng)味化合物含量
        實(shí)驗(yàn)樣品:斯里蘭卡胡椒油樹脂、印尼胡椒油樹脂、越南胡椒油樹脂;
                                                    5電子鼻色譜圖
                                                                                                        圖3 斯里蘭卡胡椒油樹脂、印尼胡椒油樹脂、越南胡椒油樹脂指紋圖譜
        胡椒油樹脂中分析出10種含量較高的香氣成分,胡椒油樹脂香氣成分與胡椒精油香氣成分種類相同,主要差異體現(xiàn)在α-蒎烯、3-蒈烯、D-檸檬烯的相對(duì)含量上,可利用α-蒎烯、3-蒈烯、D-檸檬烯相對(duì)含量用于區(qū)分不同產(chǎn)地胡椒油樹脂種類。
                                                                                               表3 斯里蘭卡胡椒油樹脂、印尼胡椒油樹脂、越南胡椒油樹脂特征化合物相對(duì)含量
                                                        6風(fēng)味化合物含量
         對(duì)斯里蘭卡胡椒原料、印尼胡椒原料、越南胡椒原料原料及胡椒提取物進(jìn)行指紋圖譜與物質(zhì)定性分析,不同產(chǎn)地胡椒原料在成分種類上有差異,斯里蘭卡、印尼胡椒原料較越南胡椒原料復(fù)雜,主要體現(xiàn)在檜烯、γ-松油烯相對(duì)含量上;胡椒提取物成分種類相同,相對(duì)含量不同,可能是造成不同產(chǎn)地胡椒提取物香氣差異的主要原因α-蒎烯、3-蒈烯、D-檸檬烯等成分可用來鑒別不同產(chǎn)地胡椒提取物產(chǎn)品類別,且電子鼻分析速度快,可大大節(jié)約成本。
        主成分分析
        由圖4原料主成分分析可以看出,三種胡椒原料之間存在顯著差異,現(xiàn)有數(shù)據(jù)可對(duì)未知產(chǎn)地的原料進(jìn)行產(chǎn)地區(qū)分,前提是原料來自三個(gè)產(chǎn)地,若后續(xù)加大其余產(chǎn)地?cái)?shù)據(jù)庫后,可對(duì)不同產(chǎn)地的胡椒原料進(jìn)行產(chǎn)地區(qū)分,同時(shí)積累大量數(shù)據(jù)后,可對(duì)原料建立質(zhì)量指標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫。
                                                             7PCA圖
                                                                                                                           圖4 斯里蘭卡、印尼、越南胡椒原料主成分分析
        對(duì)3類胡椒精油樣品進(jìn)行PCA分析,結(jié)果如圖5所示,橫、縱坐標(biāo)分別代表PCA轉(zhuǎn)換得到的第1主成分(PC1)和第2主成分(PC2)的貢獻(xiàn)率圖5中PC1方差貢獻(xiàn)率為99.131%,PC2的方差貢獻(xiàn)率為0.0339%,兩者累計(jì)方差為99.165%,代表了樣品中的絕大部分信息,這說明測(cè)試胡椒精油樣品風(fēng)味差異明顯,PCA方法能較準(zhǔn)確區(qū)分不同產(chǎn)地的胡椒精油。三種產(chǎn)地胡椒精油之間存在明顯差異,同時(shí)不斷完善數(shù)據(jù)庫,建立不同產(chǎn)地精油質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系,保證胡椒精油類產(chǎn)品質(zhì)量,提高胡椒精油產(chǎn)品市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力。
                                                              8PCA圖
                                                                                                              圖5 斯里蘭卡胡椒精油、印尼胡椒精油、越南胡椒精油樣品主成分分析
        對(duì)3類胡椒油樹脂樣品進(jìn)行PCA分析,結(jié)果如圖6所示,PC1方差貢獻(xiàn)率為97.847%,PC2的方差貢獻(xiàn)率為1.941%,兩者累計(jì)方差為99.788%,代表了樣品中的絕大部分信息,這說明測(cè)試胡椒油樹脂樣品風(fēng)味差異明顯,PCA方法能準(zhǔn)確區(qū)分不同產(chǎn)地胡椒油樹脂產(chǎn)品。
                                                             9PCA圖
                                                                                                            圖6 斯里蘭卡胡椒油樹脂、印尼胡椒油樹脂、越南胡椒油樹脂樣品主成分分析
        0結(jié)論
        利用超快速氣相電子鼻技術(shù),解析不同產(chǎn)地胡椒及胡椒提取物揮發(fā)性電子鼻響應(yīng)特征并構(gòu)建指紋圖譜庫,通過主成分分析建立胡椒及胡椒提取物分類的有效判別模型,可為胡椒及胡椒提取物氣味模式分類、特征描述和產(chǎn)地區(qū)分提供依據(jù)。
        來源:感官科學(xué)與評(píng)定,轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明來源。
        參考文獻(xiàn):張玉涵,李騰飛,魏占姣等.基于超快速氣相電子鼻構(gòu)建不同產(chǎn)地胡椒及胡椒提取物指紋圖譜庫及應(yīng)用研究[J].中國食品添加劑,2021,32(09):
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